熒光素能與真菌細胞壁的β-多糖物質相結合，如纖維素、幾丁質等，但不能與組織細胞結合。熒光素在紫外線激發光下使各種絲狀真菌及酵母菌呈現熒光，包括念珠菌屬、毛蘚菌屬、表皮蘚菌屬、小孢子菌屬、組織胞漿菌屬及曲霉屬等。染液中氫氧化鉀能溶解樣品組織中的角質、消除雜質，促溶劑的加入使得樣品組織中的角質溶解的更加迅速，組織更加透明，提高了檢測靈敏度。選取的背景復染液能降低樣品組織的背景亮度，使熒光信號更加清晰。